肿瘤细胞培养成纤维细胞
依据肿瘤细胞比成纤维细胞贴壁速度慢的*的地方,并接合运用不加血清的营养液,把包括两类细胞的细胞悬液反反复复贴壁,使两类细胞互相离合,操作办法与传代相同。
1 待细胞成长达一定数目后,倒出旧培育液,用胰酶克化后,Hanks 冲洗2次,参加不含血清的培育液,吹打制成细胞悬液;
2 取编号为此A、B、C三个培育瓶;首先把悬液接种入A培育瓶中。置恒温培养箱中静止培育5~20分钟后,轻轻倾侧培育瓶,让液体集中瓶角后慢慢吸出所有培育液,再接种入B培育瓶中后;向A瓶中补给少量培育液置培养箱中接着培育;
3 培育B瓶中细胞5~20分钟后,接处置A的办法,把培育液灌注C培育瓶中;再向B瓶中补加营养物质放培养箱KLYQ中。
当三个瓶内都包括培育液后,均在生化培养箱中接着培育。如操作成功,第二天仔细查看可见A瓶主要为成纤维细胞,B瓶两类细胞相杂,C瓶有可能主要为癌细胞。*时可反反复复处置多次,直到癌细胞醇化截止。