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Southern Blot法
点击次数:1395 更新时间:2012-02-06

Southern Blot

Southern Blot是一种常用的DNA定量的分子生物科学办法。

其原理是将待测的 DNA 样品固定在固相载体(硝镪水纤维膜或锦纶膜)上,与标记的核酸探针施行杂交,在与探针有同源序列的固相 DNA 的位置上显露出杂交信号,经过检验测定信号的有无、强弱可以对样品定性、定量,因此计算出转入的复印数。Southern法正确性高、特别优异性强,但存在消耗时间费劲的欠缺。这里经常使用实验室器具干燥箱KLYQ培养箱KLYQ、恒温摇床KLYQ

 额外,因为Southern法检验测定不通过靶断片的扩增(PCR),普通每个电泳通道需求10-30 μgDNA ,在实际操作中就需求较数量多的植物材料来提出取得DNA ,而转基因植物的愈伤团体在无菌条件下通过用筛子选、从新派生后普通都比较细弱,不适宜数量多抽样。假如外源基因在插合乎时尚发生基因重组,导致限止性酶切位点遗失,Southern 法也没有办法检验测定到。这些个因素都抑制了Southern法在T0代植物中检验测定外源基因复印数的应用电热恒温鼓风干燥箱、真空干燥箱、干燥箱KLYQ

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